Clonación, expresión, caracterización y modelado de esterasas putativas de Corynebacterium glutamicum ATTC 13032

  1. Navarro González, Inmaculada
Revista:
Anales de biología

ISSN: 1138-3399 1989-2128

Año de publicación: 2012

Número: 34

Páginas: 75-87

Tipo: Artículo

DOI: 10.6018/ANALESBIO.0.34.12 DIALNET GOOGLE SCHOLAR lock_openDIGITUM editor

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Resumen

El objetivo de este trabajo fue clonar, expresar, purificar y caracterizar algunos genes de Corynebacterium glutamicum ATCC13032, identificados como enzimas de la superfamilia de las esterasas/lipasas. De todos los genes clonados, solo se pudo estudiar la proteína codificada por el gen Cg2528. Se purificó y caracterizó la proteína. Su máxima actividad la presentó 40 ºC y a pH 8. Presentó una gran estabilidad en presencia de disolventes orgánicos como el DMSO y el metanol. Con respecto al análisis cinético, presentó una mayor actividad sobre los p-nitrofenil ésteres y los naftilos que sobre el S-methiltiobutanoato. Se dilucidó la triada catalítica alineando la secuencia de aminoácidos. La estructura tridimensional se predijo usando la esterasa (2OGS) de Geobacillus stearothermophilus como molde