Genes de mucor circinelloides regulados por crga, un gen regulador de la carotenogenesis

Resumen

El gen crgA es un regulador negativo de la biosintesis de carotenos en el hongo Mucor circinelloides. La biosintesis de carotenos en este hongo es inducida por la luz azul, pero las estirpes mutantes en el gen crgA sobreacumulan carotenos tanto en la luz como en la oscuridad. Esta sobreacumulacion de carotenos esta relacionada con una sobreexpresion de los genes estructurales de las carotenogenesis. Con el objetivo de profundizar en la funcion del gen crgA se han aislado, mediante la tecnica de hibridacion diferencial de mensajeros ("differential display"), dos genes reprimidos por el gen crgA: los genes cigA y cigB. Para determinar la funcion de estos genes se han generado,mediante reemplazamiento genico, mutantes nulos para cada gen. La falta del gen cigB no provoca la aparicion de un fenotipo caracteristicos, mientras que la falta de gen cigA tiene como consecuencia una reduccion del tamaño de las colonias, surgiriendo la implicacion del gen cigA en el crecimiento vegetativo. El hecho de que los mutantes en el gen cigA o cigB no esten afectados en carotenogenesis, junto con la implicacion del gen cigA en el crecimiento, apunta a que el gen crgA esta implicado en la regulacion de otros procesos celulares aparte de la carotenogenesis. Analisis de secuencia que flanquean el locus crgA ha permitido identificar un gen, denominado cigC, con alta homologia al gen cigA y cuya expresion es tambien reprimido por crgA. De esta forma se ha definido una familia de genes cig, que podria estar compuesta por el menos seis miembros, tal como sugieren los experimentos de hibridacion del DNA genomico con sondas de cigA, en condiciones de baja homologia. La expresion de los genes cigA y cigC en respuesta a la luz se ha analizado a nivel de la acumulacion de mensajeros. Los niveles de mensajero de ambos genes es inducida por la luz. La aparicion de varios maximos tras el pulso sugiere la existencia de distintas velocidades de transduccion de la señal lum