Estudios sobre el diagnostico y la variabilidad molecular del virus del moteado del clavel (carmv)

Abstract

El clavel (Dianthus caryphyllus L.) uno de los cultivos más importantes dentro del sector ornamental, se ve particularmente afectado por una serie de enfermedades de origen viral que limitan de manera muy significativa su comercializacion. Entre los virus que afectan al clavel caben destacar el CarMV, CERV, CLV,CVMV,CRSV o CIRV. Ya que en la producción de material vegetal es imprescindible aplicar unos controles exhaustivos de ausencia de virus, se necesitan tecnicas de diagnostico sensibles y rapidas. En este trabajo se ha desarrollado un metodo basado en la hibridación molecular no radioactiva que permite detectar simultaneamente 5 virus de RNA que afectan a clavel (CarMV,CLV, CVMV,CRSV y CIRV) sin disminir los limites de sensibilidad con respecto a la deteccion individualizada. Este test de deteccion simultaneo no introduce ningun paso adicional en el proceso y puede ser llevado a cabo en el mismo tiempo en el que se realizan los ensayos individuales. Tambien relacionado con la optimización de este metodo en diagnosis rutinaria, se ha hecho un estudio de la distribucion viral en plantas infectadas, que nos ha permitido elegir el mejor tejido para dichos análisis, asi como poder diferenciar 2 patrones de distribución viral que pueden sugerir vias de transmisión distintas entre los 2 grupos de virus. Ademas, se ha llevado a cabo la caracterización molecular de un aislado español del Virus del moteado del clavel (CarMV), cuya estructura primaria se ha utilizado para comparar el grado de variabilidad con los dos aislados secuenciados hasta el momento de este virus, y para realizar un analisis filogenetico de todos los miembros de la familita Tombusviridae. Asi, se ha puesto de manifiesto que se trata de secuencias muy conservadas a pesar de estar separadas tanto espacial como temporalmente. La comparación de la región 3¿del RNA genómico del CarMV entre los 3 aislados mostro que las posiciones variables en esta region correspondi