Clonación, sobreexpresión y caracterización bioquímica de s-adenosilhomocisteína hidrolasasíntesis de s-adenosilhomocisteína

Abstract

La presente Tesis Doctoral recoge los trabajos desarrollados en la clonación, sobreexpresión y caracterización bioquímica de la enzima S-adenosilhomocisteína hidrolasa y la consecuente síntesis del producto enzimático S-adenosilhomocisteína. En ella, se describe el desarrollo de un nuevo método de medida de la actividad, el cual es aplicable en la búsqueda y selección de microorganismos productores de la enzima. En la tesis se reporta por primera vez la clonación del gen que codifica para la síntesis de S-adenosilhomocisteína hidrolasa, a partir de microorganismos mesofílicos y termofílicos de interés industrial. También se reporta la expresión de las enzimas provenientes de dichas fuentes en altos niveles, su purificación y la caracterización bioquímica de las s-adenosilhomocisteína hidrolasas purificadas. La caracterización bioquímica ha permitido seleccionar a una de las enzimas recombinantes obtenidas en su posible aplicación como biocatalizador en la síntesis de S-adenosilhomocisteína, la cual ha sido utilizada en un bioreactor.