Aplicación de a/b hidrolasas en la síntesis y resolución de compuestos de interés farmacéutico

Résumé

Las ?/? hidrolasas constituyen uno de los grupos enzimáticos más amplios y extendidos de la naturaleza, presentan gran variedad de especificidades e incluyen enzimas como lipasas, dienelactona hidrolasas, serin-carboxipeptidasas, acetilcolinesterasas, otras esterasas y muchas más enzimas. En los últimos años, se han publicado numerosas revisiones que intentan explicar cómo, para un mismo núcleo estructural, existe tal diversidad catalítica (Heikimheimo y col., 1999, Nardini y Dijkstra, 1999, Holmquist, 2000; Qian y col., 2007). Incluso se ha creado la valiosa base de datos ESTHER, que aporta continua información sobre secuencias, estructuras tridimensionales y propiedades catalíticas de esta superfamilia (Renault y col., 2005). La presente Tesis Doctoral estudia dos grupos concretos de ?/? hidrolasas, las acetil xilan esterasas (AXEs) y las carboxilesterasas (CEs). Los genes clonados y proteínas expresadas en este trabajo presentan un plegamiento ?/? similar en su estructura terciaria, sin embargo, sus centros catalíticos (triada y cavidad) se organizan de forma diferente, lo cual explicaría que AXEs y CEs no catalicen los mismos sustratos. Efectivamente, una de las principales diferencias entre estos dos grupos de enzimas es esa especificidad de sustrato, mientras las AXEs han demostrado ser activas frente a intermedios avanzados de ?-lactámicos semisintéticos, las CEs son capaces de hidrolizar una mezcla racémica del (R, S) ketoprofeno metil ester, para dar el ketoprofeno, un antiinflamatorio no