Caracterización estructural y funcional de los genes bgs2+ y bgs3+ de schizosaccharomyces pombe

Résumé

El objetivo de este trabajo es la caracterización de genes de Schizosaccharomyces pombe relacionados con la biosíntesis del beta- 1,3 glucano, componente estructural mayoritario de las paredes celulares fúngicas. Los genes FKS1 y FKS2 de Saccharomyces cervisiae y cps1*/bgs1 de S.pombe codifican proteínas transmembranales propuestas como subunidades catalíticas de la enzima beta-1,3 glucan sintasa. Mediante una búsqueda en bases de datos de genes homólogos a FKS1 y FKS2 de S.cerevisiae, pudimos encontrar el gen bgs2+, bgs3* se identificó a partir del mutante ehs2-1, hipersensible a Calcoflúor y Equinocandina.bgs3+ también pertenece a la familia de genes FKS de S.pombe. Los resultados de nuestro estudio, pueden resumirse así: A,- La expresión de bgs2+ están restringida al proceso de esporulación. Bgs2p se localiza en la membrana de las proesporas.bgs3+, en cambio, se expresa en todas las condiciones de crecimiento excepto durante la esporulación. Los niveles de Bgs3p no varían cuando las células crecen en diferentes medios o condiciones, y se localiza en las zonas de remodelación de la pared celular. B.- bgs3+ es un gen esencial, requerido para la germinación y el crecimiento vegetativo y bgs2+ es un gen esencial en la formación de las ascosporas. No es posible complementar los defectos de los mutantes nulos bgs2 y bgs3 sobreexpresando las otras proteínas bgs de S.pombe. C,- La eliminación de bgs2+ disminuye la actividad glucán sintasa en esporulación y bloquea la maduración de la pared de las ascosporas. La sobreexpresión o eliminación de bgs3+ es letal y causa defectos en la morfología celular y deposición de materiales de pared. Estas observación relacionan Bgs2p y Bgs3p con la biosíntesis del beta glucano y sugieren que diferentes actividades glucán sintasa desempeñan funciones esenciales y no solapadas en la síntesis o transporte de los polímeros de beta-glucano en la levadura de fisión