Shewanella putrefaciens Pdp11 and arginine as feed additives for gilthead seabream (Sparus aurata L.)effect on skin regeneration and intestinal function in wounded fish

Resumo

El objetivo de la presente Tesis Doctoral es explorar el efecto de la administración dietética de SpPdp11 y ARG sobre la regeneración de la piel y la función intestinal en doradas heridas. Los resultados del análisis de imágenes de las heridas externas macroscópicas mostraron que la administración dietética de SP y ARG1 podría facilitar significativamente el cierre de la herida. Las heridas cutáneas mostraron algunos cambios negativos en los parámetros metabólicos del suero de dorada. Aún así, la administración de SP y ARG1 podría aliviar significativamente estos impactos y mantener la homeostasis. Además, las actividades de las enzimas inmunes en el moco de la piel se vieron reforzadas por la suplementación de SpPdp11 y 1% ARG. A diferencia de los mamíferos, la fase de formación de coágulos de sangre falta en el proceso de curación de heridas de los peces, aunque están presentes las otras etapas, que incluyen inflamación, reepitelización, formación de tejido nuevo y remodelación. Las dietas SP y ARG1 aliviaron la respuesta inflamatoria de la piel, lo que podría atribuirse al efecto beneficioso de SpPdp11 y ARG1 sobre la capacidad antioxidante de la piel. En el proceso de reepitelización, la administración dietética de SpPdp11 y ARG al 1% aceleran la eliminación de tejidos necróticos, liberan factores de crecimiento de la matriz de la herida y ayudan a la migración y proliferación de queratinocitos, y por lo tanto facilitan la reepitelización en la piel de dorada herida. Los impactos de las heridas de la piel en la función intestinal son multifacéticos. La histología intestinal mostró que se observaron infiltraciones más profundas de leucocitos mixtos en la lámina propia en el intestino distal de doradas 7 días después de la herida. El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) y el análisis de la reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR) indicaron que las heridas en la piel aumentaron la expresión del nivel de inmunoglobulina en el intestino. El presente estudio también analizó la expresión génica de citocinas inflamatorias, parámetros relacionados con la inmunidad, mucinas y proteínas de unión estrecha, como puntos cruciales para evaluar el estado de salud de la función de barrera intestinal de la dorada. Las heridas en la piel mejoraron significativamente la respuesta inflamatoria intestinal mediada por la vía de señalización del receptor tipo toll (TLR)/factor de transcripción nuclear-κB (NF-κB) y la secreción de mucinas, pero suprimieron de manera prominente los parámetros intestinales relacionados con la inmunidad y el ensamblaje de las uniones estrechas. Sin embargo, la administración de la dieta SP y ARG1 alivió las profundas infiltraciones de leucocitos mixtos en la lámina propia y la reducción de la función inmune intestinal. Además, la adición dietética de SpPdp11 y ARG al 1% podría reducir notablemente la inflamación intestinal y la sobresecreción de mucinas en la luz intestinal inducida por la herida de la piel. Además, también se elevó la expresión de las proteínas de unión estrecha. En general, la inclusión en la dieta de SpPdp11 y ARG al 1 % facilitó la cicatrización de heridas y la reepitelización de la piel dañada, alivió la respuesta inflamatoria en el área de la herida y mejoró la neovascularización y la síntesis de proteínas de matriz en los sitios de herida de la piel de pescado. Además, las heridas en la piel provocaron una respuesta inflamatoria intestinal que incluyó cambios en la capa de moco y alteraciones en las uniones estrechas. Además, la administración preventiva de SpPdp11 y ARG al 1% alivió las disfunciones intestinales provocadas por heridas cutáneas en doradas.