Superviviencia de las células ganglionares de la retina axomatizadas tras la administración de BDNF y NT-3

Resumen

Objetivos: Investigar si la administración intraocular de dos neurotrofinas, el Factor Neurotrófico Derivado del Cerebro (BDNF) y la NT-3, aminora la muerte de las células ganglionares de la retina (CGR) inducida por la axotomía intraorbitaria. Métodos: En ratas adultas, las CGR se premarcaron con el trazador fluorescente persistente Fluoro- Gold (FG) según métodos descritos previamente (Vidal-Sanz et al., 1988). Siete días más tarde, el nervio ótico (NO) izquierdo se seccionó en su origen en la parte posterior del globo ocular (Vidal-Sanz el al. 1987) y se practicó una punción intraocular, inyectando o no 5µl de PBS con un 1% de BSA (solución vehículo) sola o con un contenido de: i) 5µg de BDNF ó; ii) 5µg de NT-3. El ojo derecho se utilizó como control. Siete y catorce días tras la sección del nervio óptico las ratas se sacrificaron, sus retinas se procesaron y se examinaron bajo microscopía de fluorescencia para estimar la supervivencia de las CGR de acuerdo con métodos previamente descritos (Villegas-Pérez et al. 1993). Resultados: En las retinas control, siete días después de aplicar FG, las densidades medias (céls/mm²) de células marcadas con este trazador tuvieron como media±ESM el valor de 2144±98, n=20. Siete días después de la axotomía la densidad media fue de 1378±56, para n=6. En las retinas en las que se practicó punción ocular o se inyectó solución vehículo ó NT-3, las densidades medias de CGR marcadas con FG disminuyeron a 1023±68 (n=5), 1460±125 (n=11) y 1304±104 (n=4), respectivamente. En las retinas en las que tras la axotomía se inyectó BDNF (2149±184, n=4) se observaron densidades similares a las obtenidas en animales control. Catorce días después de la axotomía simple, las densidades medias de CGR marcadas decrecieron a 316±23 (n=31). Densidades superiores se observaron en los grupos de retinas en los que se practicó axotomía y i) punción intraocular sin inyección, con valor de 423±47 (n=5); ii) inyección de vehículo, con 507±23 (n=10); y iii) inyección de NT-3, con 525±83 (n=6). Densidades comparables se observaron en los grupos tratados con BDNF, 1137±91 (n=4). Conclusiones: Estos resultados indican que: i) Siete días tras la sección del nervio óptico y la administración de BDNF, la supervivencia de las CGR lesionadas es total. Ii) Catorce días después de la axotomía el número de CGR que sobreviven en los grupos tratados con BDNF es de tres a cuatro veces el número de células que sobreviven en los grupos tratados con NT-3, con vehículo sólo o en los grupos sin tratamiento, de manera que se sigue observando un efecto trófico sobre una subpoblación de CGR que constituye aproximadamente el 40% de la población original de dichas CGR.