Sustancias Oxígeno Reactivas (ROS) en Semen Congelado-Descongelado de Porcino

Résumé

La generacion de ROS fue medida por citometria de flujo en muestras espermaticas descongeladas incubadas sin (niveles basales) o con (niveles inducidos) un inductor de ROS (1 mM de tert-butyl hidroperoxido) por 30 min a 39 ��C y 5% de CO2. Ademas, fueron simultaneamente tenidas con 2�f, 7�f-diacetato de diclorodihidrofluoresceina, acetil ester (1 mM, CM-H2DCFDA), para estimar la produccion de ROS e, ioduro de propidio (1.5 mM) para excluir la poblacion espermatica muerta. Los eyaculados de nueve verracos fueron congelados con 3% de glicerol y descongelados a .1200 o .1800 oC min-1. La produccion de ROS fue medida a los 0, 60, 120, 240 y 360 min en muestras mantenidas a 21-23 ��C (no incubadas), o a 39 oC y 5% de CO2 (incubadas). La velocidad de descongelacion no registro influencia (P>0.05) sobre la produccion de ROS. La generacion de ROS fue constante (P>0.05) en el tiempo en las muestras no incubadas, pero mostro un incremento progresivo en las muestras incubadas, siendo significativa (P<0.05) desde los 120 min en niveles basales o 60 min de incubacion en niveles inducidos. Ademas, una significativa variabilidad eyaculado/verraco fue evidente, tanto en niveles basales como inducidos en las muestras incubadas. La produccion de ROS basal e inducida estuvo significativamente (P<0.01) correlacionada con la calidad espermatica. La tecnica utilizada es de gran utilidad para evaluar capacidad funcional en espermatozoides congelados-descongelados; sin embargo, se requieren estudios adicionales para estandarizar la misma y establecer umbrales indicativos de perdida de calidad espermatica.