Estudios sobre el movimiento a larga distancia, localizacion subcelular e interacciones con el huesped experimental nicotiana tabacum cv. Xanthi nc del virus del enrollado de la hoja del cerezo (clrv)

Resumen

EN ESTE TRABAJO SE HAN REALIZADO ESTUDIOS SOBRE EL MOVIMIENTO A LARGA DISTANCIA DEL CLRV EN PLANTAS DE TABACO, LA LOCALIZACION SUBCELULAR, LA APLICACION DE SONDAS NO RADIACTIVAS EN EL DIAGNOSTICO DEL VIRUS Y EN LA HIBRIDACION TISSUE-PRINTING Y FINALMENTE LA INDUCCION Y DISTRIBUCION ESPACIAL DE LAS QUITINASAS ACIDICAS Y DE SUS MRNAS. DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS SE HA CONCLUIDO QUE LA HIBRIDACION MOLECULAR NO RADIACTIVA ES UNA TECNICA FIABLE Y SENSIBLE PARA EL DIAGNOSTICO DEL CLRV TANTO EN HUESPEDES HERBACEOS (TABACO) COMO LEÑOSOS (NOGAL). LAS DIFERENTES APROXIMACIONES UTILIZADAS PARA ESTUDIAR LA LOCALIZACION SUBCELULAR DEL CLRV HAN PUESTO DE MANIFIESTO UNA LOCALIZACION FUNDAMENTALMENTE CITOPLASMATICA DEL VIRUS. ASIMISMO, LOS ESTUDIOS DE LOCALIZACION DEL RNA VIRAL SUGIEREN QUE LA REPLICACION DEL CLRV ESTE ASOCIADA A LAS VESICULAS MEMBRANOSAS. LOS RESULTADOS OBTENIDOS TAMBIEN DEMUESTRAN QUE LA HIBRIDACION TISSUE-PRINTING ES UNA TECNICA MUY APROPIADA PARA ESTUDIAR EL MOVIMIENTO VIRAL A LARGA DISTANCIA Y HA PERMITIDO UN SEGUIMIENTO DE LA LOCALIZACION Y DISTRIBUCION FINAL DEL VIRUS EN LOS DIFERENTES TEJIDOS. ANALISIS COMPARADOS MEDIANTE LA TECNICA INMUNOTISSUE-PRINTING Y LA HIBRIDACION TISSUE-PRINTING NO RADIACTIVA MOSTRARON EL MISMO PATRON DE DISTRIBUCION PARA EL RNA Y LA CP VIRAL POR LO QUE SE SUGIERE UN POSIBLE REQUERIMIENTO DE LA CP EN EL MOVIMIENTO A LARGA DISTANCIA. LA DISTRIBUCION FINAL DEL VIRUS ESTA ADEMAS INFLUENCIADA POR LA DISPOSICION FILOTACTICA DE LAS HOJAS EN LA PLANTA Y POR EL ESTADO DE DESARROLLO DE LAS MISMAS. LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN LOS ESTUDIOS ACERCA DE LA INDUCCION Y DISTRIBUCION DE LAS QUITINASAS ACIDICAS Y SUS MRNAS HAN PUESTO DE MANIFIESTO QUE LA INDUCCION DE LAS PROTEINAS PR ACIDICAS NO ES UN FENOMENO EXCLUSIVO DE LA REACCION DE TIPO HIPERSENSIBLE, OBSERVANDOSE UNA EVIDENTE ACUMULACION DE ESTAS PROTEINAS Y DE SUS MRNAS QUE SE ENCUENTRAN ESENCIALMENTE ASOCIADOS A LAS ZONAS SINTOMATICAS, Y SE INDUCEN CON UN C