Acción de la melatonina sobre las células madre humanas en la trodiferenciación osteoblásticaestudio experimental in vitro

Abstract

Palabras clave -Melatonina -Regeneración ósea -Células madre Resumen Las células madre mesenquimales (CMM) residen en la médula ósea y tienen capacidad de autorrenovación, proliferación y de diferenciarse a osteoblastos, adipocitos y condrocitos. La melatonina es una hormona que posee numerosas propiedades como eliminar radicales libres y estimular la formación ósea. Los objetivos del estudio fueron: determinar la densidad óptima de cultivo y valorar la diferenciación celular de las CMM con diferentes concentraciones de melatonina (0.01, 50, 100 y 150 µm) y dexametasona (100 µM) mediante el ensayo de proliferación celular, citometría, determinación de la producción de fosfatasa alcalina, determinación de osteogénesis y Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). Los resultados mostraron mayor proliferación celular con 1500 células por pocillo y capacidad por parte de la melatonina a 50 µM de promover la diferenciación de las CMM a osteoblastos. Por lo tanto, la melatonina actúa como un agente biomimético efectivo en la promoción de la regeneración ósea. Abstract Mesenchymal stem cells (MSCs) are undifferentiated multipotent cells characterized by their capacity to auto-renew and differentiate into adipocytes, osteoblasts and chondrocytes. Melatonin is a hormone released from the pineal gland in response to darkness and it has been implicated in osteogenesis through a variety of mechanisms. The aims of this study were to determine the optimum planting density and to evaluate MSC differentiation with different quantities of melatonin exposure (0.01, 50, 100 and 150 µm) and dexametasona (100 µM) through cell proliferation assay, flow cytometry, phosphatase alkaline production, calcium deposits and Polymerase Chain Reaction. The results showed that the best density of cell culture is 1500 cells per well (of a 96-well plate) and melatonin at 50 µm is able to promote MSCs differentiation so melatonin behaves as a effective substrate promoter of bone tissue regeneration.