Estudios sobre la transmision, variabilidad molecular e interaccion proteina de cubierta-rnas genomicos en el virus de los anillos necroticos de los prunus(pnrsv)

Resumen

La presente tesis engloba una serie de estudios dirigidos a profundizar en el conocimiento de diversos aspectos funcionales del ciclo viral del Ilarvirus de los anillos necróticos de los Prunus(PNRSV). Como primer objetivo de la presente memoria, se abordó la localización de las particulas virales en granos del polen procedentes de nectarinas infectadas con el PNRSV con una combinacion de estrategias complementarias(moleculares y celulares), que nos permitiera resolver de manera definitiva esta cuestión y ayudara a clarificar el mecanismo de transmisión del virus. El análisis mediante hibridación molecular no radioactiva puso de manifiesto que en nectarina infectada, el virus invade todos los organos florales. Estudios mediante hibridación in situ revelaron que en el grano de polen el virus se localiza internamente y que en el estadio bicelular, se acumula en la celula vegetativa mientras que,en la generativa no se encuentran cantidades detectables de particulas virales. Estos resultados sugieren que en el proceso de transmisión vertical en este huesped, el PNRSN no seria transmitido directamente de los gametos masculinos al ovulo sino que el virus alcanzaria la semilla recien formada invadiendo el saco embrionario desde el tubo polinico. El PNRSV es un importante patógeno en frutales de hueso cultivado en los que provoca en algunas ocasione alteraciones importantes en calidad y produccion de frutos. El segundo objetivo consistió en un analisis de la variabilidad de la estructura primaria del RNA 3 de diversos aislados del PNRSV procedentes de varios huespedes y mostrando diferente sintomatologia(patotipos), con el fin de tratar de identificar motivos de secuencia que pudieran correlacionarse con las propiedades biologicas de los aislados. Al igual que en otros trabajos realizados paralelamente por otros autores, no se encontró una clara correlación entre la variabilidad molecular del RNA 3 y su especificidad de huesped y/