Caracterizacion molecular de la resistencia a quinolonas en 100 aislamientos clinicos de staphylococcus aureus mediante el analisis del polimorfismo estructural de las cadenas sencillas (sscp)

Resumen

Las infecciones por Staphylococcus aureus suponen en la actualidad un grave problema sanitario, siendo las quinolonas en muchas ocasiones la alternativa más adecuada en el tratamiento de las mismas, aunque la resistencia a quinolonas afecta en la actualidad a un gran número de clones. Con dicha resistencia se han relacionado mutaciones que afectan a diversos genes, y que ocurren en regiones bien delimitadas de los mismos, lo que hace accesible su estudio mediante la técnica de SSCP. Se determinó la actividad de diversas quinolonas frente a 100 cepas de S. aureus procedentes de aislamientos clínicos y se caracterizaron los mecanismos de resistencia a quinolonas presentes en dichas cepas. Las moléculas más activas fueron PD 138312 y PD 140248 cuyos valores de CMI50 y CMI90 resultaron 64 veces inferiores a los obtenidos con ciprofloxacino, si bien las moléculas ensayadas se vieron afectadas por la adquisición de resistencia a quinolonas por S. aureus de forma general. La alteración más frecuente en GyrA fue la de serina-84 por leucina (que confirió resistencia de alto nivel) y la más frecuente en GrlA la de serina-80 por fenilalanina (que confirió resistencia moderada). No se detectaron cambios en GyrB. La diana primaria de las quinolonas fue la topoisomerasa IV, ya que en ella se detectaron alteraciones de forma aislada, mientras que todas las sustituciones de Ser-84 por Leu en GyrA se acompañaron de cambios en GrlA. Se detectaron cuatro variantes en el promotor de norA con distintos niveles de expresión, cuya contribución a la resistencia quedó condicionada por el fenotipo de las topoisomerasas.