Lesion plaquetaria de almacenamientodegradacion del complejo glicoproteico ib/ix/v y utilidad de inhibidores de la activacion plaquetaria en su prevencion

Abstract

Los objetivos de esta Memoria fueron, en primer lugar, analizar si durante el almacenamiento de Concentrados de Plaquetas (CPs) se produce una pérdida de la reactividad de las células a la trombina, y la posible relación con la disminución de sitios de alta afinidad para el agonista localizados en el complejo glicoproteico Ib/IX/V. En segundo lugar, se valoró la utilidad de diversos agentes en la prevención del daño plaquetario por almacenamiento: (1) Sustancias moduladoras del AMPc (PGE1, forscolina, teofilina e isobutil-metilxantina IBMX ), y aniones orgánicos (piruvato y acetato sódicos) en la conservación a 22 grados C; (2) ThromboSol (combinación de los efectores de segundos mensajeros adenosina, nitroprusiato sódico, dipiridamol, ticlopidina, quinacrina y amiloride) en el almacenamiento a 4 grados C; (3) Solución modificada de ThromboSol (nitroprusiato sódico, dipiridamol y amiloride) y dimetilsulfóxido DMSO al 2%, en la criopreservación de las células. Para ello se utilizó metodología estándar de laboratorios de Hematología y Bioquímica en el análisis de recuentos celulares, volúmenes plaquetarios medios, pH, concentraciones de dióxido de carbono, oxígeno, bicarbonato, glucosa y lactato deshidrogenasa. Los niveles de lactato se valoraron mediante análisis enzimáticos, y las de tromboxano B2 y AMPc con inmunoensayos. La expresión en superficie plaquetaria de glicoproteínas (GP) se evaluó con citometría de flujo. La unión de trombina y de ligandos (factor von Willebrand y fibrinógeno) a las plaquetas se estudió con análisis de unión en "frío" y "caliente", respectivamente. De los estudios realizados en este trabajo, se obtuvieron los siguientes resultados/conclusiones: 1. A lo largo del almacenamiento estándar de CPs se produjo una progresiva disminución de las respuestas de las células a la trombina. Durante dicho periodo se observó una reducción en la expresión superfi