Mecanismos de resistencia a quinolonas y macrólidos en corynebacterium spp. Actividad de nuevos antimicrobianos

Resum

INTRODUCCION Dentro del género Corynebacterium, C.amycolatum y C.jeikeium son las especies aisladas con mayor frecuencia en muestras clínicas. En los últimos años, hemos asistido a un aumento del número de infecciones producidas por estos microorganismos. Una de las principales características de esta especies es su multirresistencia, permanenciendo desconocidas sus bases moleculares. OBJETIVOS 1,- Determinar la actividad in vitro de diferentes quinolonas, macrólidos y otros antimicrobianos (clindamicina, glucopéptidos, cetólidos, quinupristina-dalfopristina y linezolide) frente a 57 cepas de C.amycolatum y 36 cepas de C.jeikeium. 2,- Caracterizar los mecanismos de resistencia a quinolonas de diferentes cepas de cultivos tipo y 22 muestras clínicas mediante la amplificación y secuenciación de la QRDR de los genes gyrA y parC. 3,- Intentar establecer relaciones filogenéticas entre las distintas especies mediante la comparación de la QRDR de los genes gyrA y parC. 4,- Caracterizar los mecanismos de resistencia fenotípicos y genotípicos a macrólidos de la s57 cepas de C.amycolatum y 36 cepas de C.jeikeium mediante la técnica de doble disco eritromicina-clindamicina y la amplificación del gen erm(X). MATERIAL Y MÉTODOS Aislamiento de muestras clínicas (57 cepas de C.amycolatum y 36 cepas de C.jeikeium). Caracterización morfológica y bioquímica de los microorganismos. Clasificación de las cepas de C.amycolatum en multirresistentes y multisensibles. Estudio de la sensibilidad bacteriana in vitro de 23 antimicrobianos, determinando la CMI mediante técnica de dilución en agar. Estudio de los mecanismos de expulsión activa en la resistencia a quinonolas y macrólidos. El diseño de los cebadores se realizó sobre secuencias conservadas de la QRDR de S.aureus para la amplificación de los genes gyrA y parC, y sobre la secuencia descrita de C.jeikeium para el gen erm(X). Fenotipo de resistencia a MLSB med