Micromorfología comparada de estadios inmaduros de Calliphoridae (InsectaDiptera) de interés forense

Resum

Resumen: Las Ciencias Forenses tienen en la Entomología Forense un apoyo muy importante, no solo en el establecimiento del intervalo postmorten (IPM) (Entomología Médico-Legal), sino también en ambientes antrópicos (Entomología Urbana) y, de productos almacenados (Entomología de los productos almacenados). Los dípteros, y muy especialmente la familia Calliphoridae, son los principales insectos en la fauna sarcosaprófaga, ya que todas las fases inmaduras de gran parte de sus especies se desarrollan en este tipo de ecosistemas (especies necrófagas). El conocimiento morfológico que permite la diferenciación inequívoca de las especies de califóridos es escaso ya que, para obtener estudios micromorfológicos detallados de todos los caracteres de interés taxonómico, son necesario estudios mixtos, combinando microscopía óptica (MO) y electrónica de barrido (MEB). En relación con ello, es conveniente recordar que los procedimientos de recogida y conservación de muestras forenses recomendados por la asociación europea de entomología forense (EAFE) no se ajustan a los protocolos habituales de preparación de muestras para microscopía electrónica de barrido (MEB). Debido a esto, en esta tesis nos hemos planteado evaluar diferentes protocolos de procesado de muestras para microscopía electrónica de barrido a fin de establecer cuál es el más adecuado para la preparación de ejemplares inmaduros de los dípteros sarcosaprófagos para su observación al MEB (huevo, larvas I, II y III y pupario) y aplicarlo, junto a técnicas estándar de MO, en la descripción micromorfológica de todos estos estadios en cinco especies de califóridos de interés forense (Calliphora vicina Robineau-Desvoidy, 1830, Calliphora vomitoria Linnaeus, 1758, Chrysomya albiceps Wiedemann, 1819, Protophormia terraenovae Robineau-Desvoidy, 1830, Lucilia sericata Meigen, 1826), para establecer aquellas características que permitan tanto la correlación morfológica de los estadios en cada especie, como su uso taxonómico en la diferenciación de especies dentro de las subfamilias Calliphorinae, Chrysomynae y Lucilinae. Si bien la fijación con etanol ha resultado satisfactoria en los ejemplares inmaduros estudiados, lo que confirma que las recomendaciones de la EAFE son compatibles con el uso del MEB, los fijadores aldehídicos complejos se han revelado como los más indicados para este tipo de muestras y técnica de microscopía. Así, se propone su uso siempre y cuando el material forense recolectado se conserve con vida hasta su llegada al laboratorio para su tratamiento. El estudio morfológico de las cinco especies de califóridos estudiados ha arrojado, sobre todo atendiendo a los resultados obtenidos de la observación al MEB, que hay suficiente variabilidad en diferentes caracteres para poder realizar su diferenciación al nivel de especie en cada uno de los estadios inmaduros. Sin embargo, la escasez de datos bibliográficos de otras especies obtenidos con este tipo de microscopía, a excepción de los huevos y las larvas de primer estadio, no permite una adecuada comparación de éstas con nuestras especies. De hecho, las descripciones de las larvas de segundo y tercer estadio, así como los puparios, de todas las especies estudiadas constituyen las primeras descripciones completas basadas en técnicas mixtas de MO y MEB. No obstante, y con los datos disponibles en la literatura científica, se ha podido constatar el potencial taxonómico de diferentes caracteres, como el patrón de bandas espinosas, la morfología de las espinas, el órgano ventral y el lóbulo labial, los cirros, los espiráculos anterior y posterior, la distribución de las papilas posteriores y la protuberancia anal, a pesar de que no se han podido utilizar de forma homogénea en la identificación del resto de especies de califóridos de ámbito europeo por falta de descripciones previas.