Mirna como nuevos moduladores del sistema hemostáticoimplicaciones en su desarrollo y fisiopatología

Resum

El sistema hemostático es un sistema complejo que comprende diferentes procesos fisiológicos donde intervienen plaquetas, coagulación y fibrinólisis; que responde ante un daño vascular de forma precisa y a través de una serie de procesos proteolíticos que están restringidos espacial y temporalmente al sitio donde se produce el daño endotelial. Diferentes aspectos fisiopatológicos del sistema hemostático, centran nuestra atención: i) desde el punto de vista patológico, la regulación del sistema hemostático puede verse alterada por diferentes causas, resultando en el desarrollo de patologías como la trombosis venosa profunda (TVP) o hemorragias. ii) y desde el punto de vista fisiológico, ha sido probada que existe una heterogeneidad en la población en cuanto a niveles circulantes en plasma de las proteínas hemostáticas y que también se constata durante el desarrollo del sistema hemostático. La implicación de variaciones de proteínas hemostáticas puede ser extremadamente relevante para el desarrollo de trombosis o hemorragias. Sin embargo, a pesar del creciente número de estudios que tratan de determinar los factores genéticos de riesgo de trombosis, la base molecular de las variaciones interindividuales de los elementos hemostáticos en la población y durante el desarrollo hemostáticoson todavía ampliamene desconocidas. Por lo tanto es interesante abordar dichos problemas desde otra perspectiva. Nosotros proponemos a los microRNA (miRNA) como potenciales moduladores del sistema hemostático. Los miRNA son una abundante clase de pequeños ARN no codificantes cuya función es la de reprimir la expresión génica. El objetivo de esta Tesis, es mostrar la potencial relevancia de los miRNA sobre el sistema hemostático. Para ello evaluamos la expresión diferencial de miRNA entre hígados de ratones recién nacidos e hígados de ratones adultos, asociándose con los extraordinarios cambios en los niveles circulantes de proteínas hemostáticas hepáticas, que se producen tras el nacimiento; por otro lado y con la ayuda de algoritmos de predicción de sitios de unión de miRNA, planteamos otra aproximación. De forma dirigida, seleccionamos una importante proteína hemostática, el FT, e identificamos mediante un estudio in silico miembros del grupo de miRNA miR-17~92 como potencial reguladores del FT. Estas predicciones fueron más tarde validadas a través de estudios in vitro. Nuestros resultados sugieren que los miRNA pueden actuar como moduladores del sistema hemostático, en particular, mostramos que miR-18a y miR-19b, potenciales moduladores de antitrombina tienen una variación en los niveles de expresión inversa y estadísticamente significativa con los niveles de expresión de antitrombina durante el desarrollo post-natal. Nuestros datos sustentan la hipótesis de que modificaciones post-traduccionales durante el desarrollo, como la glicosilación, también podrían estar moduladas por miRNA. Adicionalmente nuestros resultados muestran que miembros del grupo de miRNA miR-17~92, concretamente miR-19b y miR-20a, juegan un papel relevante en hemostasia, ya que estos miRNA modulan la expresión del factor tisular en monocitos. Finalmente, mi Tesis explora de forma novedosa el potencial efecto que variaciones genéticas en los genes que codifican miRNA o en la región 3¿no codificante de los ARNm podrían tener en la incidencia de trombosis.