Estudios funcionales de la tirosinasa en el desarrollo de la retina de mamíferos

Zusammenfassung

El objetivo principal de esta tesis es el estudio del papel de la tirosinasa en el desarrollo de la retina de ratón. Para cumplir este objetivo se ha generado un sistema de expresión génica inducible por doxiciclina en ratones transgénicos con el que regular, temporal y espacialmente, la expresión del gen de la tirosinasa de forma reversible. Estudios posteriores con este sistema permitirán evaluar si la activación del gen de la tirosinasa en ratones albinos supone variaciones fenotípicas en la retina de los ratones. Por otro lado, se analizó el papel de la región controladora de locus (LCR) del gen de la tirosinasa en el desarrollo de la retina de ratón utilizando como herramienta ratones transgénicos que carecen de dicha LCR. Estos estudios demostraron que dicha LCR es necesaria para el adecuado establecimiento y manteniemiento del dominio de expresión del gen de la tirosinasa a lo largo del desarrollo embrionario. Su ausencia provoca un retraso temporal en la iniciación y acumulación de pigmento en el epitelio pigmentado de la retina (RPE) durante el desarrollo. Análisis morfológicos de estos mismos ratones que carecen de la LCR del gen de la tirosinasa, en cuyas retinas conviven pigmentadas y células albinas, indicaron que las interacciones puntuales que se producen entre las células del RPE y la neuroretina de ratón en desarrollo, que son críticas para el desarrollo de la retina, son de tipo local y no de tipo global. Por último, se dilucidó el patrón de expresión del gen de la tirosinasa en etapas embrionarias mediante métodos directos de detección de expresión génica (Hibridaciones in situ), demostrando que el patrón de expresión del gen de la tirosinasa en ratón se restringe al epitelio pigmentado de la retina en estadios tempranos del desarrollo embrionario.