Caracterización de los receptores de nucleótidos en astrocitos de cerebelo de ratónimplicaciones fisiológicas

Résumé

Los nucleótidos de purinas y pirimidinas median sus efectos biológicos, a nivel extracelular, actuando a través de receptores específicos de membrana, denominados receptores purinérgicos P2. Los receptores P2 fueron agrupados en dos grandes familias, P2X y P2Y. Los receptores P2X son canales iónicos activados por ATP y en mamíferos se han caracterizado 7 subtipos (P2X1-7). Por su parte, los receptores metabotrópicos P2Y son acoplados a proteínas G y a la fecha se han clonado 8 subunidades (P2Y1, 2,4,6,11,12,13,14). Los receptores P1 y P2, solos o en combinación, son expresados en prácticamente todas las células vivas y median una considerable variedad de funciones fisiológicas y patofisiológicas. Debido a las características de los receptore s P2 en el SNC, así como las pocas herramientas farmacológicas para discernir entre sus distintos subtipos se optó por establecer un modelo de estudio en ratón, ya que en esta especie se construyen constantemente animales genéticamente modificados que proporcionan sistemas confiables para realizar estudios bioquímicos y fisiológicos tanto en condiciones normales como patológicas. Al comparar entre la rata y el ratón, se encontraron diferencias en la edad límite del animal para iniciar un cultivo de astrocitos cerebelosos, la cual influye en los procesos de senescencia de los cultivos. Los astrocitos de cerebelo de ratón constituyen una población homogénea de células que responden a receptores nucleotídicos. Mediante diferentes técnicas hemos demostrado que los astrocitos cerebelosos de ratón, coexpresan varios receptores funcionales de tipo ionotrópico: el P2X7 y posiblemente el P2X5, así como metabotrópico: el P2Y1, P2Y2/P2Y4 (solos y/o formando heterómeros) y el P2Y6. Los cultivos de astrocitos cerebelosos de ratón silvestre (P2X7 / ) expresan receptores P2X7 funcionales que tras ser activados por períodos prolongados, median la muerte celular. Los análisis comparativos funcionales entre animales tipo silvestre y P2X7 -/- validan el modelo KO en la astroglía de ratón.